用細胞凋亡檢測試劑盒的注意事項


為保證得到理想的實驗結果在使用此試劑盒之前請認真閱讀該注意事項。
 
1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
2.Annexin V-FITC和Propidium iodide是光敏物質,在保存與操作時請注意避光。
3.Propidium iodide(PI)能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用。
4.在細胞洗滌的最后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留影響實驗結果。
5.PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首先進行Annexin V-FITC染色,上機前5分鐘再加入PI染色。
6.整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作。
7.反應完畢后請盡快檢測,因為細胞凋亡是一個動態的過程,反應1小時后熒光強度就開始衰變。
8.成功的檢測凋亡受以下幾種因素的影響,如細胞類型、細胞膜上PS的密度、發生凋亡時PS翻轉的比例、誘導細胞凋亡的方法、所用試劑、誘導凋亡的時間等,把這些影響因素進行優化對實驗成功是非常必要的。

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